Пцр на хламидии: как сдавать мазок на анализ

Подготовка и сдача анализа на хламидии методом ПЦР

Урогенитальные хламидии относятся к инфекциям бактериального происхождения, механизмом передачи которых считается половой. Анализ ПЦР на хламидии позволяет выявить их присутствие в человеческом организме. Необходимо заметить, что хламидии относятся к группе распространенных возбудителей инфекций у человека.

Общие сведения

Хламидиоз относится к венерическим заболеваниям, которые передаются половым путем и представляют немалую опасность для здоровья человека. Причиной хламидиоза считают внутриклеточных микроорганизмов – хламидий.

В наше время среди мужчин и женщин чаще всего выявляют генитальную форму болезни. Хламидии обладают способностью повреждать эпителий половых органов, что приводит к формированию осложнений в виде заболеваний мочеполовой системы.

Достаточно часто инфекционный процесс приводит к появлению:

  • воспаления уретры;
  • эндоцервицита;
  • артрита;
  • бесплодия;
  • патологических процессов во время вынашивания ребенка.

Если возбудитель заболевания атакует мужчин, то у них может развиваться:

  • простатит;
  • цистит;
  • атрофия предстательной железы;
  • эпидидимит;
  • проктит.

Лечение хламидиоза должно проводиться только традиционными методами с применением антибактериальных препаратов, в противном случае эффекта наблюдаться не будет.

Что касается выявления заболевания у мужчин и женщин, то оно проводится:

  • культурной методикой – осуществляется забор биологического материала на питательные среды;
  • молекулярно-биологической методикой – ПЦР;
  • взятием мазков на цитологическое обследование;
  • серологическим исследованием или ИФА – данный способ позволяет осуществить определение наличия в сыворотке крови человека антител к возбудителю заболевания.

Теперь рассмотрим метод ПЦР-диагностики более детально.

Техника забора материала для анализа ПЦР

Диагностика хламидиоза считается задачей не из легких, ведь присутствие возбудителя невозможно обнаружить при обычном осмотре или при проведении исследования мазка на микрофлору.

У женщин мазок на хламидии методом ПЦР берут из влагалища, для этого используют специально предназначенные пластиковые зонды. После взятия материала их помещают в пробирку, содержащую транспортную среду (муколитик розового цвета). Данная пробирка стерильная, использовать ее разрешается только один раз.

У мужчин проводят соскоб с урогенитального канала. Головку члена протирают физиологическим раствором, проводят массаж уретры и вводят зонд в мочеиспускательный канал на 1–2 см. После этого его помещают в стерильную пробирку, которая плотно закрывается.

Процесс исследования

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) относится к группе методов диагностики, которые отличаются скоростью и высоким уровнем достоверности.

Анализ на хламидии методом ПЦР считается чрезвычайно чувствительным по сравнению с другими методами диагностики, например с иммунофлюоресцентным анализом крови (ИФА), результаты которого довольно часто занижают через субъективность оценки результатов и недостаточный уровень чувствительности антигенов. Важным моментом считается то, что интерпретацию результатов должен проводить только квалифицированный специалист.

Процесс исследования состоит из:

  • денатурации – при температурных показателях 94 градуса происходит замена двойной цепи ДНК, которая трансформируется в одноцепочечную;
  • отжига;
  • полимеризации – данная стадия характеризуется проведением синтеза новых цепей ДНК.

Обратите внимание, что полученные результаты в обязательном порядке должны сопоставляться с общим состоянием человека, поэтому правильную оценку результата может осуществить лишь доктор.

Правила подготовки

Перед тем как сдавать мазок ПЦР на хламидии, необходимо ознакомиться с некоторыми правилами и рекомендациями. Их выполнение позволит получить верный результат.

Важно! Забор материала не проводится у женщин во время менструального цикла. Объясняется это тем, что присутствие кровяных выделений на слизистой оболочке мешает осуществить забор материала.

Так как для проведения ПЦР-диагностики хламидиоза применяют специально предназначенные тест-системы, сдаваться мазок должен только при соблюдении определенных условий:

  • исследуемая личность должна воздержаться от мочеиспускания на протяжении трех часов до момента забора материала;
  • в течение трех дней до предстоящего обследования необходимо исключить из своего рациона алкоголь, воздерживаться от половых отношений, не проводить спринцеваний, не использовать вагинальных свечей и мазей;
  • на протяжении двух недель до момента обследования исследуемая личность не должна принимать никаких антибактериальных препаратов.

Проведение диагностики хламидиоза считается достаточно важным моментом, ведь только сдача анализа дает возможность осуществить своевременное адекватное лечение.

Интерпретация результатов

Как уже отмечалось, расшифровывать результаты проведенного исследования должен только квалифицированный врач. Результат может быть:

  • отрицательным – свидетельствует об отсутствии следов инфекции (возбудителя хламидиоза) в исследуемом материале;
  • положительным – подтверждение того, что исследуемый материал содержит в себе следы хламидийной инфекции.

Необходимо помнить, что полимеразная цепная реакция дает возможность увидеть качественный результат, а не количественный. При некоторых патологических процессах наличие бактерий не считается свидетельством присутствия болезни.

Подведя итог, хочется акцентировать внимание на том, что при выявлении заболевания не нужно паниковать и отчаиваться – хламидиоз успешно лечится, главное – вовремя обнаружить патологию и обратиться за помощью к доктору.

Для устранения риска заражения необходимо внимательно относиться к себе и своему здоровью, проходить регулярные профилактические осмотры, которые помогут определить наличие патологических процессов в организме.

Источник: https://ParazityCheloveka.ru/bolezni/ptsr-na-hlamidii-mazok-analiz.html

Анализ хламидии на ПЦР: что это такое и как сдавать, как берут мазок у женщин

Медицине известны инфекции, практически незаметные для больного человека по причине своего вялого и бессимптомного течения. К числу подобных коварных заболеваний относится хламидиоз, возбудителей которого не показывают привычные плановые анализы и диагностические методы.

Обнаружить опасные бактерии даже тогда, когда инфекция находится в стадии инкубационного периода, помогает анализ крови на хламидии методом ПЦР.

Что это такое, где можно сдать этот анализ и как к нему правильно подготовиться?

Клиническая картина заболевания

Одним из самых распространенных заболеваний половой сферы, поражающим как мужчин, так и женщин, является хламидиоз. Его возбудитель, которого удается без труда обнаружить лишь методом ПЦР – хламидия трахоматис. Что это за организм, и почему он настолько неуловим?

Проблема в том, что хламидии являются бактериями уникального типа, отличающимися атипичными механизмами размножения и жизнедеятельности.

В отличие от прочих паразитов, живущих за счет тела человека, хламидии практически никак себя не проявляют в течение инкубационного периода и после него.

Но как только иммунная система хозяина дает сбой, провоцированные бактериями воспалительные процессы набирают силу, и дают о себе знать рядом симптомов.

Именно при следующих жалобах пациенты чаще всего обращаются к врачу для прохождения ПЦР диагностики хламидиоза:

  • Неприятные ощущения при мочеиспускании.
  • Зуд в области половых органов.
  • Выделения патологического характера из влагалища и полового члена.
  • Частые позывы в туалет.
  • Незначительные сбои в менструальном цикле у женщин.
  • Вялость, недомогание, повышение температуры.

Поскольку клиническая картина не имеет ярко выраженных признаков, диагностировать хламидиоз удается лишь после проведения исследования по одной из утвержденных Минздравом технологий:

  • Экспресс-тест.
  • ИФА.
  • Соскоб на хламидиоз.
  • Культуральный метод.
  • Анализ крови или мазок на хламидии методом ПЦР.

Каждый из перечисленных видов диагностики характеризуется определенным процентом достоверности, а также рядом преимуществ и недостатков.

Определить анализ, необходимый в конкретном случае, способен только лечащий врач – гинеколог, уролог или венеролог.

Инфекция, полученная во время беременности, нередко провоцирует самопроизвольный аборт. Хламидиоз матери передается новорожденному малышу при прохождении через родовые пути, провоцируя у малыша серьезные заболевания органов зрения и дыхания.

Именно по этим причинам своевременная диагностика хламидиоза столь важна. Кроме того, человек может являться носителем болезнетворных бактерий и быть опасным для общества, даже не догадываясь об этом.

Поэтому работники медицины рекомендуют проявлять бдительность, и самостоятельно сдавать анализ крови на хламидии ПЦР-методом в особых ситуациях:

  • Частая смена половых партнеров.
  • Игнорирование современных методов контрацепции.
  • Половой акт супруга/супруги с другим человеком.
  • Наличие подтвержденного заболевания у случайного или постоянного партнера.
  • Беременность.
  • Частые выкидыши.
  • Наличие признаков, указывающих на присутствие зппп.

Почему при наличии данных показаний, стоит попытаться обнаружить хламидии ПЦР-методом? Что это за анализ и почему его результатам стоит доверять больше, чем остальным?

Общая информация об исследовании

Метод ПЦР или полимеразная цепная реакция на хламидиоз – высшая точка эволюции в области лабораторной диагностики.

Это молекулярный анализ, основы которого были изобретены в 70-х годах прошлого века в качестве эксперимента.

Суть метода заключается в многократном копировании выделенного участка ДНК до состояния, в котором возможна визуальная детекция инородных организмов.

Преимущества

В отличие от большинства методов, применяемых в микробиологии, данный анализ позволяет экономить время.

Кроме того, обнаружение болезнетворных бактерий возможно даже при условии их малой концентрации, а также в течение инкубационного периода.

Данные критерии важны для гинекологии и урологии, поэтому для диагностики уреаплазмы, микоплазмы и хламидий анализ на ПЦР является самым оптимальным видом исследования, позволяющим исключить дополнительные анализы.

Помимо высокой точности, ПЦР имеет ряд иных преимуществ:

  • Анализ диагностирует инфекцию очень быстро – лаборанту хватает одного дня.
  • Обнаружить хламидиоз на ПЦР можно сразу после инфицирования.
  • Внешние факторы и состояние здоровья пациента оказывают минимальное влияние на достоверность результата.
  • Для диагностики требуется немного материала.

Чаще всего для анализа берут кровь пациента, но в некоторых случаях приходиться сдавать мазок или соскоб, чтобы выявить паразитов в слизистых. Лучше всего довериться специалисту и предоставить ему право выбора необходимого материала для проведения исследования и постановки точного диагноза.

Где и как сдавать анализ на ПЦР на хламидии

Для РФ метод ПЦР не в новинку с середины 90-х годов прошлого столетия. Сегодня сдать анализ можно практически в любой клинике – как в бюджетной, так и в платной. Срок предоставления результатов варьируется в пределах 1-2 дней.

Как сдавать ПЦР на хламидии? Мужчинам и женщинам перед проведением анализа специалисты дают некоторые рекомендации, позволяющие достичь максимальной надежности результата:

  1. Не употреблять алкоголь накануне сдачи материала.
  2. Не рекомендуется употребление антибактериальных препаратов незадолго до анализа и в день его сдачи. Срок, который необходим организму для выведения антибиотиков, зависит от конкретного лекарства.
  3. Кровь сдается натощак в первой половине дня.

Мазок на ПЦР на хламидии берут из влагалища или из мочеиспускательного канала. Врачи не рекомендуют ходить в туалет за 3 часа до сдачи анализа, а также заниматься сексом в течение 3 дней до исследования. Кроме того, желательно воздержаться от банных процедур накануне проведения диагностики.

Перед тем, как брать материал на ПЦР на хламидии у женщины или мужчины, специалист подробно рассказывает о сути диагностики. Он поясняет, что требуется от пациента, и что будет делать лаборант.

Читайте также:  Норма толщины эндометрии по дням цикла

Расшифровка результатов – это тоже работа лечащего врача. Однако большинство учреждений предоставляет анализ с традиционной формулировкой, не требующей объяснений – «отрицательно» или «положительно».

Источник: https://101parazit.com/mikroorganizmy/bakterii/hlamidii/chto-takoe-i-kak-sdaetsya-analiz.html

Как правильно сдать анализы на хламидии Chlamydia trachomatis: мазки и соскобы на ПЦР, NASBA, кровь на ИФА

28.05.2017

4.6 тыс.

3.1 тыс.

9 мин.

Время чтения: 9 мин.

Возбудитель мочеполового хламидиоза – Chlamidia trachomatis — микроорганизм, способный размножаться только внутри клетки (чаще всего клетки эпителия мочеполовых органов). Хламидиоз часто характеризуется скрытым и бессимптомным течением, чем и обусловлена частота возникающих на его фоне осложнений.

Долгое время, до создания метода амплификации нуклеиновых кислот, диагностика хламидиоза была затруднена, так как при обычном микроскопическом исследовании возбудитель не виден. Была попытка внедрения цитологического метода с окраской мазка по Романовскому-Гимзе и выявлением специфических внутриклеточных включений.

Но такой метод требовал значительных затрат экономических ресурсов, времени, наличия опытного квалифицированного лаборанта. И это все при низкой информативности данного метода — порядка 10%.

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (перейдите по внутренней ссылке). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза «урогенитальный хламидиоз», была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител.

На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности.

Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Согласно Федеральным клиническим рекомендациям, для диагностики мочеполового хламидиоза могут использоваться:

  1. 1ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
  2. 2NASBA (метод амплификации РНК).
  3. 3Выделение хламидий в культуре клеток.
  4. 4Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества — доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
  5. 5Серологические тесты.
  6. 6Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

  1. 1Скрининг  половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
  2. 2Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
  3. 3Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
  4. 4Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
  5. 5При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
  6. 6Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
  7. 7При подготовке к внутриматочному вмешательству.
  8. 8При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

Суть метода ПЦР — обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность ПЦР-диагностика в режиме реального времени (у женщин этот тест называется Фемофлор). С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

  • Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

  1. 1При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
  2. 2При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.
  • Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения  — 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

5. Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

  • Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях — 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

  • Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин — 85-95%).
  • По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы.  Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета — собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

6. Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

  1. 1Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.

  2. 2Результат может быть «положительный» (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и «отрицательный» (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

  1. 1Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
  2. 2При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
  3. 3Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

  1. 1Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
  2. 2При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
  3. 3Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
  4. 4Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может «замаскировать» наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
  5. 5При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

7. Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Читайте также:  Викасол для остановки месячных: инструкция по применению

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

  1. 1Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
  2. 2Высокая частота перекрестных реакций.
  3. 3Высока частота ложноположительных реакций.
  4. 4Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
  5. 5Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

  1. 1Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
  2. 2Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
  3. 3Быстрота выполнения.
  4. 4Простота забора и хранения материала.

8. Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в  питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики — длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

9. Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

9.1. Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода — около 65-70%, а специфичность 90-100%.

9.2. РИФ

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода — около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

  1. 1Прилепская В.Н., Устюжанина Л.А. УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ: КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ В АКУШЕРСКО-ГИНЕКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ // РМЖ. 1998. №2. С. 2
  2. 2Васильев М.М. Диагностика и лечение урогенитальной хламидийной инфекции // РМЖ. 2000. №6. С.

    261

  3. 3Европейские рекомендации по диагностике и лечению инфекций, вызываемых Chlamydia trachomatis. 2015 г.

    — 2015 European guideline on the management of Chlamydia trachomatis infections E Lanjouw , S Ouburg , HJ de Vries, A Stary, K Radcliffe and M Unemo

  4. 4ФЕДЕРАЛЬНЫЕ КЛИНИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЕДЕНИЮ БОЛЬНЫХ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ. РОССИЙСКОЕ ОБЩЕСТВО ДЕРМАТОВЕНЕРОЛОГОВ И КОСМЕТОЛОГОВ. Москва, 2013 г.

Источник: http://sterilno.net/infection/stds/kak-sdavat-analiz-pcr-na-xlamidii.html

Пцр на хламидии

Хламидийная инфекция или хламидиоз — болезнь, которую вызывают микроорганизмы хламидии.

Самые опасные хламидии Chlamydia psittaci и pecorum. Этот вид хламидий находиться только в человеческом организме.

Микроорганизмы очень устойчивы к влиянию внешней среды и не погибают до 2-х суток. Гибнут при температуре не менее 100 градусов в течение одной минуты, также погибают при обработке их антисептиком.

Причины заражения хламидийной инфекцией

Причины заражением урогенитальным хламидиозом:

  • способ передачи инфекции при сексуальном контакте;
  • бытовой способ инфицирования;
  • внутриутробное заражение плода;
  • инфицирование ребенка в момент родов.

При половом способе заражения, попадание бактерий в организм происходит в момент незащищенного презервативом полового акта.

При внутриутробном заражении, ребенок инфицируется от зараженной матери. Хламидия попадает в организм ребенка уже на первом месяце зачатия, а также ребенок может заразиться во время родов, в момент прохождения по родовым путям.

Диагностика инфекции хламидиоз

Заболевание хламидиоз в организме человека в основном проходит в скрытой форме, и проявление этой инфекции происходит спустя 21 день после попадания в организм.

Внешнее обследование больного не может быть гарантией поставленного диагноза хламидиоз. Для того, чтобы установить правильный диагноз, необходимо провести ряд исследований:

  • серологические исследования;
  • микробиологические анализы;
  • пройти метод генетического зонда;
  • анализ на содержание иммуноферментов;
  • ПЦР — диагностическая проверка.

Диагностику начинают с соскоба с уретры или влагалища, а также берется мазок выделения с уретры, влагалища и маточных выделений. По результатам данного анализа видна полная картина инфицированности хламидиозом. После того, как появился метод полимеразной цепной реакции, появилась возможность более точно определять наличие хламидий, уреаплазма и микоплазма в организме.

Имунноферментатный анализ выявляет наличие бактерий точностью от 60 до 70 процентов.

Для установки диагноза используют мазок, соскоб, сперму, мочу и кровь.

Диагностика методом полимеразной цепной реакции

Пцр на хламидии — это самый эффективный метод для определения в организме наличие микроорганизмов Chlamydia psittaci и Chlamydia pecorum. Такое исследование достаточно точное, для выявления инфекции, которая передается половым путем.

Очень часто анализ Пцр на хламидии, уреаплазма, микоплазма назначается женщинам в период вынашивания ребенка. Хламидии очень опасны для внутриутробного для развития плода. Данная инфекция может привести к патологиям у будущего ребенка.

Принцип данного метода основан на обнаружении в материале для исследования генетический код возбудителя инфекции. Для проведения полимеразной цепной реакции используют любой биологический материал человека – кровь, сыворотку, мазки, соскобы, выделения из половых путей, мочевого канала, сперму.

Их помещают в специальный реактор, в который к материалу добавляют ферменты, которые и синтезируют с материала ДНК или РНК.

Если такие гены есть, то это признак инфекции. ПЦР хламидии обладает самой высокой точностью — в пределах 95 процентов и выше.

Полимеразная цепная реакция выполняется от 24 часов до 48 часов. Время выполнения анализа зависит от реактивов, которые используются при методе полимеразной цепной реакции.

Подготовка организма к анализу ПЦР

Для того, чтобы правильно провести анализ Пцр на хламидии, необходимо подготовиться:

  • за несколько дней не принимать антибиотики и антибактериальные средства;
  • не мочиться до забора соскоба с уретры минимум в течение 3 часов;
  • перед сдачей крови на анализ — не заниматься сексом 2 — 3 дня;
  • минимум за 2 дня прекратить прием контрацептивов и других лекарственных средств;
  • процедуры интимной гигиены необходимо провести без мыла и вечером накануне перед анализом;
  • минимум за 3 дня до ПЦР не принимать алкоголь;
  • кровь для ПЦР сдается на пустой желудок;
  • во время менструации анализ ПЦР не делается.

Если количество бактерий сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum превышает показатель 10 в 4 степени, тогда лечения заболевания хламидиоз не избежать. При назначении лечения необходимо учитывать количественный показатель инфекции, а также чувствительность сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum к различным группам антибиотиков.

Метод полимеразной цепной реакции при заболеваниях организма

Назначается диагностика ПЦР:

  • в период вынашивания ребенка;
  • при хламидиозе у сексуального партнера;
  • при беспричинном бесплодии;
  • при признаках хламидиоза.

ПЦР назначают также при обнаружении признаков и симптомов некоторых заболеваний:

  • СПИД;
  • гепатит В и С;
  • уреаплазмоз;
  • микоплазмоз;
  • кандидоз;
  • гарднереллез;
  • трихомониаз;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • папилломавирусная инфекция (ВПЧ);
  • герпес.

Преимущества метода полимеразной цепной реакции

По сравнению с анализами и тестами, которые применяются для обнаружения половых и венерических инфекций, метод полимеразная цепная реакция имеет преимущества:

  • высока чувствительность препаратов на инфекцию хламидия, уреаплазма, микоплазма, что позволяет диагностировать данную инфекцию как в острой форме развития заболевания хламидиоз, так и в хроническом периоде болезни;
  • высочайший уровень специфичности данного метода;
  • сжатые сроки проведения исследования.

При хронической стадии хламидиоза, когда очень сложно обнаружить бактерии в организме, метод ПЦР отлично справляется с диагностикой заболевания на такой стадии хламидиоза.

Лечение заболевания хламидиоз

Хламидийная инфекция — лечение требует длительного времени, процесс этот довольно сложный.

Урогенитальный хламидиоз лечат совместно врач иммунолог и гинеколог женский организм, и врач иммунолог и уролог для лечения мужского организма.

Основные препараты, которые используются в лечение — это антибиотики разных групп и направлений:

  • макролиты;
  • тетрациклины;
  • фторхинолоны.

Вместе с антибиотиками в процессе лечения участвуют:

  • поливитамины;
  • иммуномодуляторы;
  • препараты карсил, фестал;
  • противогрибковые препараты;
  • пробиотики.

Женщины, у которых хламидии находятся в половой сфере, вместе с лечебными препаратами назначают спринцевание и вагинальные антисептические тампоны.

У мужчин применяют местное лечение болезни при помощи ионофореза, клизм, свечей и массажа простаты.

Для лечения хламидии трахоматис в организме, назначаются следующие лекарственные средства:

  • Азитромицин 500 мг 1 раз в день;
  • Доксициклин 0,1 мг 2 раза в день;
  • Левофлоксацин  500 мг 1 раз в день;
  • Эритромицин 500 мг 4 раза в сутки;
  • Офлоксацин 300 мг 2 раза в сутки;
  • Рокситромицин 150 мг 2 раза в сутки;
  • Спирамицин 3 мг 3 раза в сутки.

По необходимости больному предписывают экстракты лекарственных трав, которые укрепляют иммунитет: эхинацеи, элеутерококка, аралии.

Источник: https://wmedik.ru/zabolevaniya/infektsionnyie-zabolevaniya/pcr-na-xlamidii.html

Зачем нужен мазок на хламидии во время беременности

Прежде чем назначить грамотное лечение, врачом проводится полноценная диагностика, включающая различные современные методы.

Результаты лабораторных исследований имеют первостепенное значение, так как помогают определить заболевания, передающиеся половым путем, которые имеют стертые симптомы или вовсе протекают без них.

Почему необходимо выявлять хламидиоз? После зачатия данный вопрос особенно актуален, так как не исключено, что у женщины с хламидиозом беременность может протекать с осложнениями для своего здоровья и для здоровья ребенка.

Мазок — главный диагностический критерий

Мазок на хламидии при беременности – незаменимая процедура, уточняющая диагноз. Его может назначить не только гинеколог, но и дерматовенеролог.  Берут материал в обязательном порядке в следующих случаях:

  • при постановке женщины на учет по беременности;
  • при наличии симптомов заболевания (например, если имеются патологические выделения с неприятным запахом);
  • при обнаружении какого-либо заболевания, которое передается половым путем.

Кроме того, анализ необходим:

  • после того, как женщина прошла курс антибактериальной терапии против хламидиоза;
  • в молодом и зрелом возрасте среди женщин, ведущих активную половую жизнь с разными партнерами по сексу;
  • при наличии в анамнезе заболеваний репродуктивной системы (эндометрит, сальпингит, которые плохо поддаются лечению);
  • анализ на хламидии при беременности, а также при ее отсутствии следует делать после незащищенного сексуального контакта с партнером, история сексуальной жизни которого не известна;
  • перед различными вмешательствами на органах мочеполовой системы.

Не всегда мазок берется из цервикального канала или непосредственно из влагалища, материал для исследования нередко находится в уретре, ротоглотке, прямой кишке.

Подготовка к данной процедуре:

  • прежде чем сдать анализ, необходимо исключить за несколько дней сексуальные контакты;
  • беременной женщине следует совершить последний акт мочеиспускания за несколько часов до процедуры;
  • за 48 часов до взятия мазка не рекомендовано тампонировать влагалище или вводить в него суппозитории.

Из истории лабораторной диагностики заболевания

На протяжении длительного времени, определить заболевание с помощью лабораторных методов было затруднительно. Непосредственно под микроскопом в мазке микроорганизмы не заметны.

Попытка окрашивать мазок и определять впоследствии специфические включения хламидий также не дал результатов, так как подобная диагностика требовала больших материальных затрат и опытного специалиста.

К тому же, метод отличался низкой информативностью (всего 10%).

Серологические методы наиболее верны. Самый первый из них был проведен при урогенитальном хламидиозе. В настоящее время используется редко из-за ложных результатов.

Практически два десятилетия наиболее точным анализом являлся метод прямой иммунофлюоресценции. Проводится он до сих пор, но не при каждом случае, так как для него необходимы дорогостоящие реагенты.

Как проводится процедура взятия материала

Берется мазок в амбулаторных условиях, то есть при посещении гинеколога в его кабинете. Сама процедура проходит на гинекологическом кресле и по времени занимает несколько минут. Кроме подготовки пациентки, о которой было написано выше, необходимо, чтобы были выполнены следующие условия:

  • анализы у беременных и не только должен брать опытный специалист;
  • процедура должна проходить в условиях асептики, то есть инструментарий должен быть стерильным и по возможности одноразовым;
  • цель специалиста: правильно сделать соскоб, в котором будут содержаться эпителиальные клетки без дополнительных включений.

В первом триместре беременная женщина сдает мазок не только из влагалища, но и из канала шейки матки, а также мочеиспускательного канала. На поздних сроках исследованию подлежат влагалищные выделения.

Если обнаружен хламидиоз при беременности, то гинеколог может назначить повторный анализ и только после этого женщине предлагается пройти курс антибактериальной терапии препаратами, которые не представляют опасности для плода.

Мазок берется с помощью специального зонда, после чего его рабочая часть погружается в пробирку со специальным консервирующим составом. Если мазок берется ложечкой Фолькмана, то ее погружают в пробирку с консервирующей средой, ополаскивают, после чего подвергают дезинфекции и стерилизации. Емкость с материалом закрывают и отправляют на исследование.

Важно помнить, что пройти диагностику должен и половой партнер женщины, так как признаки заболевания могут появиться вновь. Сами по себе они не так опасны, как осложнения.

Современные методы диагностики

ПЦР диагностика

Практически во всех случаях специалистом назначается полимеразная цепная реакция. Достоверность данного метода достигает 100%.

ПЦР на хламидии позволяет обнаружить ДНК, то есть генетический материал в тканях, которые подлежат исследованию.

Обнаружить ДНК удается всегда, так как она «достраивается» посредством добавления дезоксинуклеорибофосфатов и становится заметна, например, с помощью электрофореза.

Провести оценку качественной и количественной микрофлоры влагалища, а также обнаружить заболевание, можно с помощью теста, под названием фемофлор — это ПЦР-диагностика в режиме реального времени, его преимущества:

  • короткие сроки ожидания результатов;
  • высокая чувствительность к бактериям.

Целесообразно его проводить лишь для подтверждения диагноза, когда хламидиями заражен организм и клиническая картина очевидна. Отличается короткими сроками выполнения и точностью результата до 90%. Не подходит для обнаружения возбудителей, если заболевание имеет скрытое течение. В таком случае, более целесообразным будет, если женщина сдаст комплексный анализ ПЦР.

Определения РНК возбудителей

Этот метод относительно новый, но достаточно информативный. Он назначается реже, чем ПЦР. Его смысл заключается в следующем: после того, как женщины сдавали биологический материал, лаборант приступает к поиску в нем цепи РНК.

Их наличие свидетельствует о жизнедеятельности бактерий, которым РНК необходима для построения новых клеток. Ведь именно РНК принимает участие в транспортировке генетического материала.

Кроме того, по присутствию РНК специалист судит о том, насколько эффективно противомикробное лечение, а также расценивает жизнеспособность возбудителей. По ДНК, на котором основывается ПЦР, определить подобные факты не представляется возможным.

Интерпретация полученных результатов

Результаты вышеперечисленных анализов становятся готовы в ближайшие двое суток. Если возбудители обнаружены, то результат звучит как – «положительный», если не обнаружены, то – «отрицательный». Для грамотной оценки результатов следует придерживаться нижеперечисленных правил:

  • после окончания медикаментозной терапии провести контрольное исследование, при ПЦР желательно через месяц, при определении РНК – через 2 недели;
  • Наиболее благоприятное время для взятия материала спустя 3-4 недели после менструации. В первые дни вероятен ложноотрицательный результат, что обусловлено недостаточным накоплением возбудителя в эпителиальных клетках;
  • На результат исследования не влияет специальная подготовка, например, диета;
  • Если имеется подозрение на ложноположительный результат, то потребуется пересдать анализ, возможно с применением другого метода.

Биологические материалы, подходящие для диагностики

Моча вместе с кровью — ценные биологические материалы, с помощью которых также может подтвердиться диагноз. Как правило, они сдаются в комплексе с мазком.

Как правильно собрать мочу

Для диагностики потребуется именно первая порция мочи. В ней содержится слущенный эпителий в максимальном количестве. У женщин моча наименее информативна, чем соскоб, следовательно, она берется реже.

Поэтому, если пациентка сдавала мочу на исследование, врач может попросить выполнить еще мазок крови. Для исследования потребуется не более 10 мл мочи, которая должна быть выпущена в стерильную сухую емкость.

Исследование крови

Хламидиоз при беременности отразиться в результатах крови, в которой обнаружатся антитела. В инкубационный период они образоваться еще не успели, поэтому могут и не быть. О фазе течения патологического процесса судят по тому, какое антитело появляется.

Если в крови определяется одновременное появление IgA и IgG, то это свидетельствует о хронизации заболевания. Вначале заболевания появится IgA.

Для того, чтобы анализ крови на хламидии при беременности был точным, следует придерживаться нижеперечисленных рекомендаций:

  • не сдавать кровь в период лечения антибактериальными препаратами, которые исказят результаты. Врач назначит предоставить материал до лечения, чтобы определить микрофлору и ее чувствительность к лекарствам;
  • сдается материал натощак. Если принять пищу, то в ней повышается концентрация жировых частиц, которые становятся причиной мутности плазмы, что искажает результат диагностики;
  • запрещено накануне посещения лаборатории употреблять алкогольные напитки;
  • за несколько часов до исследования не рекомендуется курить, а также непосредственно перед забором материала проходить физиотерапевтическое лечение.

Выявление возбудителя с помощью различных методик

Определение возбудителя на культуре клеток

Метод хорош тем, что позволяет определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам. Смысл метода: заражение группы клеток материалом с последующим высеванием на питательную среду. Чтобы определить чувствительность, к обработанным клеткам добавляют ростовую среду с содержанием антибиотика.

Об отсутствии эффективности препарата судят о наличии появившегося роста бактерий. И наоборот, если рост уменьшился, то антибиотик окажется эффективным. Недостатками метода являются высокая стоимость и длительный срок получения результата (около недели).

Поэтому его используют редко и в случае длительной малоэффективной терапии антибиотиками.

Экспресс тест – система

В иностранных клиниках подобные методы пользуются популярностью. Готовый тест имеет покрытие, содержащее готовые антитела, которые связаны со специальным комплексом из ферментов.

Если в организме имеются антигены, то они связываются с антителами, при этом высвобождаются ферменты, что сопровождается заметным в спектрофотометр желто-зеленым свечением. Для данной диагностики нужен мазок.

Результат достоверен в 70%.

Принципы лечения

Завершает диагностику терапевтические мероприятия. Этиотропным лечением, то есть тем, которое направлено на ликвидацию возбудителя, являются антибактериальные препараты. Их, как правило, назначают с учетом чувствительности, которую определяют при некоторых методах в процессе обнаружения микроорганизма.

Основные принципы лечения:

  • своевременность приема препаратов;
  • полный терапевтический курс;
  • исключение самолечения.

Антибиотики для лечения

Беременность резко ограничивает выбор препаратов, так как прием некоторых из них опасен для здоровья плода. Решение о назначении поддерживающей, не опасной терапевтической дозы принимает врач.

К препаратам выбора относятся:

  • антибиотики фторхинолонового ряда, представителем которых является Офлоксацин. Его назначают два раза в сутки по одной таблетке;
  • макролиды – представителями являются: Сумамед, который принимают однократно в дозировке 1000 мг, Эритромицин – назначают по 500мг до 4 раз в сутки;
  • пенициллины – эффективный представитель данной группы – Амоксициллин, который следует принимать трижды в день по 500 мг на протяжении 7-10 дней.

Поддержать иммунитет возможно с помощью иммунокорректирующей терапии, например, с помощью Циклоферона. Продолжительность курса лечения – 5 дней. Его назначают вместе с антибиотиками. Неовир поддержит иммунную систему, после курса антибиотиков. Его назначают на протяжении 7 дней.

Местно могут быть назначены суппозитории: Генферон, Виферон. В амбулаторных условиях может проводиться орошение влагалища раствором антисептика, например, хлоргексидином. Исключено самолечение средствами народной медицины в виде примочек, употребления внутрь отваров в качестве основного метода и без консультации врача.

Нашли ошибку в тексте? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, и мы все исправим!

Источник: https://venerbol.ru/hlamidioz/mazok-na-hlamidii-pri-beremennosti-analiz.html

Ссылка на основную публикацию